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Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内，主要显示三价铁盐，在极少数情况下铁存在于其还原态的亚铁之中，Lillie法是显示二价铁的很好地的方法，其特异性较好。

含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁，且为金黄色，故称为含铁血黄素，当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

• 该染色法适用于石蜡切片、冰冻切片和树脂切片，切片脱蜡应尽量干净。
  
• 组织固定常采用10%中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤；避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。
  
• 整个操作过程中容器要干净，避免用金属铁制品，洗切片和容器时以蒸馏水为宜，因普通水内含铁质。
  
• Lillie Stain染色时，应根据样本情况调整着色时间。
  
• 所有切片都应使用同一个阳性对照切片，选择适合的对照非常重要；尸检肺组织是一个很好的对照，包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。
  
• 系列乙醇应经常更换新液。
  
• 冰冻切片和细胞的染色，最好根据具体情况摸索实验条件。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 组织固定于10%中性福尔马林或其他碱性固定液，常规脱水包埋。
  
• 切片厚度4μm，常规二甲苯或浸蜡脱蜡透明液脱蜡至水，蒸馏水水洗1min。
  
• 切片入Lillie Stain (见注意事项4)浸染25～30min。
  
• 蒸馏水充分冲洗2～5min。
  
• 入核固红染色液淡染细胞核5～10min，蒸馏水冲洗1～5s。
  
• 常规脱水，二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明，中性树胶封固。